Para poder conocer la estructura y organización de los genomas vegetales es necesario la clonación molecular de grandes fragmentos de secuencias genómicas para construir genotecas representativas.La construcción de genotecas genómicas en cromosomas artificiales de bacterias es una de las herramientas mas utilizadas con este fin y la estrategia elegida en este trabajo; pero cuando se trabaja con especies que presentan genomas muy grandes como el pino, realizar este tipo de genotecas es laborioso y costoso.
En este tipo de genoteca la calidad del vector BAC es clave porque esta directamente relacionada con la eficacia de la transformación, en este caso se utilizo el vector pCUGIBAC1
Para la construcción de genoteca en grupos de clones es necesario utilizar varios procesos como:
incubación, suspensión de las células, ligación, resuspención, agitación, dilución, almacenamiento, extracción.
Los grupos de la genoteca se pueden rastrear por PCR utilizando como molde el ADN de los BAC de cada grupo y un par de cebadores que cubran una región del gen de interés.
Bibliografia:
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