ALIMENTOS TRANSGÉNICOS
Los alimentos transgénicos son el más reciente fruto de la evolución tecnológica, aunque su conocimiento es incipiente e incompleto.
La ingeniería genética permite aislar desde un organismo la secuencia de interés de ADN y propagarlo en otro organismo, permitiendo obtener cantidades ilimitadas del producto codificado por dicho gen; a esto se denomina ADN recombinante, el cual se introduce en un microorganismo, que se cultiva y selecciona por su resistencia al antibiótico Al crecer se expresa el gen de interés y se introduce en el vegetal que se desea modificar, obteniéndose el producto transgénico.
El ADN recombinante ha sido muy utilizado en el campo de la medicina ya que ha permitido el desarrollo de importantes avances terapéuticos como por ejemplo la producción de insulina recombinante
En los alimentos transgénicos lo que se hace es buscar un gen que codifique una proteína; como por ejemplo una enzima que intervenga en la maduración de los frutos o en la producción de un compuesto inhibidor de multiplicación viral o de una característica estructural, que le confiera un aumento de contenido de nutrientes o una mayor tolerancia a un herbicida.
Bibliografía:
En terapia génica se usa tecnología del ADN recombinante para corregir un gen defectuoso y reemplazarlo, por el gen normal en forma permanente.
Este tipo de terapia puede ser:
- Somática: tiene validez para el individuo que la recibe y para la que existe gran consenso en su utilidad.
- Germinal: en la que no solo se modificará la información genética del individuo que la recibe, también de sus descendientes, ésta técnica tiene insospechada consecuencias por lo que despierta grandes reservas éticas y es censurada por la mayoría de científicos.
En la actualidad, se han llevando a cabo intentos clínicamente controlados de terapia génica humana.
El PGH es un proyecto de investigación que permite:
1) conocer la secuencia de todo el ADN humano
2) identificar los 30000 genes
3) conocer los genes involucrados en enfermedades genéticas, se destaca el cáncer de mama
El PGH tiene un impacto a nivel ético, legal y social. Un ejemplo emblemático es el gen que da susceptibilidad a cáncer de mama en algunas mujeres (oncogen BRACA); si una mujer se realiza el test para este gen, ¿tienen derecho las aseguradoras de salud y los empleadores conocer esta información antes de asegurar o emplear?
Finalmente el PGH contribuirá al desarrollo de nuevas drogas que permitan un tratamiento para cada paciente de acuerdo a su constitución genética.
Bibliografía:
Gracias a los últimos avances de la biología celular y molecular, los eventos cruciales de la carcinogénesis, progresión tumoral y la metástasis, están siendo analizados a nivel molecular.
Los laboratorios de Biología Molecular pueden brindar una importante información predictiva y ayudar a guiar las maniobras terapéuticas.
Entre estos nuevos podemos citar:
- Amplificación y/o sobreexpresión de oncogenes
- Secreción aumentada de factores de crecimiento
- Índice de proliferación celular
- Ploidía
- Proteínas inducidas por los estrógenos
- Proteínas del stress y Golpe de calor
- Expresión de moléculas relacionadas con la metástasis
Un nuevo mecanismo genético molecular es la interacción clave entre BRCA1 y una proteína llamada RHAMM (codificada por el gen HMMR). Estas dos proteínas actúan en un mecanismo molecular antes desconocido, que regula la polaridad de las células epiteliales.
Los investigadores han demostrado que BRCA1 y RHAMM controlan el desarrollo normal de las células epiteliales de mama; si uno o ambos genes presentan mutaciones, el desarrollo normal de las células mamarias se altera de manera que aumenta el riesgo de que aparezca un tipo específico de tumor.
Bibliografía:
El objetivo de la PCR fue determinar la prevalencia de la mutación 185delAG.
Extracción de DNA de sangre periférica
Análisis de la mutación 185delAG: Para detectar la mutación 185delAG se utilizó la técnica de un mismatch PCRque es un método para la detección de una mutación puntual que no produce ni destruye un sitio de restricción; utiliza primers o cebadores para complementar la secuencia del ADN. El ADN amplificado mutante (a diferencia de la amplificación de ADN normal), cuando se digiere con endonucleasas apropiadas, electroforesis y se sondeó con un oligonucleótido marcado apropiado, revela un nuevo fragmento, menor restricción. Alternativamente, los primers o cebadores de PCR mismatch pueden ser diseñados para crear un nuevo sitio de restricción con el ADN normal, pero no con el ADN mutante.
La técnica usada genera dos bandas de 150pb y de 20pb para el alelo normal y solo una de 170pb para el alelo mutado, pues la enzima de restricción no corta el producto amplificado si esta presente la mutación.
La confirmación de la mutación 185delAG fue realizada por:
1. Amplificación por PCR del Exon 2 del Gen BRCA1 y Electroforesis en geles denaturantes de acrilamida-bisacrilamida
2. Hibridación alelo específica: consiste en los siguientes pasos:
- Transferencia del DNA a soporte sólido mediante la técnica de Dot Blotting
- Marcación del oligonucleótido en el extremo 3'OH con digoxigenina-11-dd UTP
- Hibridación de filtros con el oligonucleótido marcado con digoxigenina-11-dd UTP
- Detección de la hibridación mediante quimioluminicencia
3. Secuenciación directa
